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凯氏定氮仪的使用经验和保养方法

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本文介绍了全自动凯氏定氮仪在蛋白质测定中的使用经验和保养方法,包括开机前检查、气泡排除、空白测定、样品处理、消化过程、回收率验证、日常清洗及部件更换等关键步骤,以确保仪器稳定性和结果准确性。

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全自动凯氏定氮仪作为测定蛋白质的重要仪器,广泛应用于乳与乳制品等农产品和食品中蛋白质含量的测定。它具有高灵敏度、分析速度快、应用范围广、所需试样少、设备和操作比较简单等特点,目前使用越来越广泛。下面就此交流一下凯氏定氮仪的使用经验和保养方法。

全自动凯氏定氮仪的简单分析装置流程由四个基本部分组成:(1)蒸馏装置;(2)滴定装置;(3)检测装置;(4)排废装置。

保证各个溶液能够满足此次试验测定,检查去离子水,碱液和接收液的使用情况,以及废液桶中废液得到了及时的清理。如果在去离子水,碱液和接收液的液位低于液位传感器的话,或废液的液位高于液位传感器的话,仪器将报警,正在进行的试验将被停止,影响测定工作的正常进行。

1.2 开机之前,保证冷却水的开关是打开了。

如果冷却水开关关闭,仪器虽然能自检通过,但是在蒸馏过程中,由于蒸馏装置的温度太高,仪器将报警,提示打开冷却水开关。打开冷却水开关后,仪器将继续工作。但此次试验被停止,影响正常测定的同时,在没有冷却水保护的情况下,对蒸馏装置具有损伤。

1.3 等1.1和1.2确认无误后开机,仪器自检,自检通过后,仪器进入等待选择程序阶段。

首先进入手动模式对滴定器中的气泡进行排除。气泡的存在会影响测定结果,因为气泡进入后,会占据标准滴定酸的体积,使标准滴定酸的体积减小,测定结果偏低。

首先打开仪器前盖,仪器报警,提示仪器前盖被打开,找一块小磁铁放在仪器前面的触点上,按面板上回车键,此时仪器默认前盖关闭。将仪器功能选择滴定器充液,滴定器活塞向上移动停止后,用收捏住滴定器的塑料软管,选择滴定器排空,滴定器活塞向下移动,等移动3~5秒后立刻松手,滴定器中气泡将上浮至滴定器上端,选择滴定器充液,气泡被排除滴定器,反复2~3次,将气泡排净后开始测定。

在空白测定时,首先测定水空白,水空白的测定是为了检查仪器的稳定程度。当前后两次空白测定值小于0.05且水空白值小于0.2时,仪器稳定。测定试剂空白,并将空白值输入仪器。如果不先测定水空白而直接测试剂空白,即在仪器不稳定的情况下就进行试剂空白的测定,将会得到偏高的试剂空白值,测定结果将偏低。

牛乳样品需要混合均匀后取样,因为牛乳样品容易脂肪上浮,不事先混合而直接从上层取样的话,测定结果将偏低。乳粉样品混合均匀后用称量纸称量,并用镊子送如消化管底部。因操作不当残留在管壁上的样品,在加入硫酸的时候用硫酸冲入消化管底部。如果残留在管壁上而不用硫酸冲入的话,将会使测定结果偏低。

在加酸的过程中,要考虑到样品的组成对消耗酸量的影响。酸量小,样品消化不完全,测定结果偏低;酸量大,在上机过程中与碱中后酸过量,游离胺不能被蒸馏出来,严重影响测定结果。

在消化过程中,先220℃预消化1小时,然后将温度升高到420℃。预消化的目的是让样品和硫酸先缓慢的反应。不预消化,浓硫酸将和样品在高温下剧烈反应,造成炭化,测定结果将偏低,炭化造成的颗粒还会在排废过程中堵塞管路,造成仪器不能正常工作。

采用硫酸铵和尿素分别对回收率进行测定。单纯的采用硫酸铵,简单快速,不要要消化,但只能保证仪器测定的部分,而不能对前处理的消化过程进行质量体系保证。尿素需要消化进行测定,对前处理和仪器测定部分全程进行质量保证。

当样品测定完毕后,采用手动功能加入80毫升水,开蒸汽蒸馏5分钟,对蒸馏装置进行清洗。清洗后取下消化管,倒掉内容物,对安全门和滴流盘进行擦拭,去除测定过程中残留的碱液。

2.1.2橡皮头的更换

在蒸馏过程中,热的碱液对蒸馏装置的橡皮头有腐蚀作用,长时间使用后,会造成橡皮头和消化管接触不密闭,导致游离胺泄露,影响测定结果。定期(一般以约为周期)对橡皮头进行检查,发现腐蚀严重,立即更换。

更换方法如下:关闭仪器电源开关,打开仪器前盖,取下安全门,用钳子夹住橡皮头一端,用力向下拉扯即可。安装新的橡皮头时,先用热水浸泡5分钟,热水使橡皮头变软,易于安装。

检测完毕后,清洗滴定缸及液位探针,防止接收液的残留附着在滴定缸的内表面,影响下次测定。

2.2.2标准酸酸溶液的更换

当采用浓度不同的标准酸溶液时,应当将仪器滴定器中残留的酸液清除掉。

排除酸液的方法;首先打开仪器前盖,仪器报警,提示仪器前盖被打开,找一块小磁铁放在仪器前面的触点上,按面板上回车键,此时仪器默认前盖关闭。将仪器功能选择滴定器充液,滴定器活塞向上移动停止后;再选择滴定器排空,滴定器活塞向下移动,反复3~5次,旧酸液将被新酸液置换出来。

定期(一般以约为周期)对排废装置进行清洗,长时间不清洗,会堵塞管路。量取25ml醋酸溶液和5ml水,采用手动蒸馏半小时,挥发的醋酸将清除排废装置内壁上残留的碱液。

当排废装置堵塞后,一般为废液缸下方的电磁阀内被炭化的颗粒堵塞。关闭仪器电源开关,打开仪器后盖,取

❓ 常见问题

Q: 凯氏定氮仪测定蛋白质时,如何排除滴定器中的气泡?
A: 打开仪器前盖,用磁铁模拟关闭状态,选择滴定器充液使活塞上移,然后捏住塑料软管选择排空,活塞下移3-5秒后松手,气泡上浮至顶端,再充液排出,重复2-3次即可。
Q: 为什么凯氏定氮仪测定牛乳样品前需要混合均匀?
A: 牛乳样品容易脂肪上浮,若不混合直接取样,上层脂肪含量高导致蛋白质含量偏低,因此需充分混匀后取样,确保结果准确。
Q: 凯氏定氮仪消化过程中为什么要先预消化?
A: 预消化在220℃进行1小时,让样品与硫酸缓慢反应,避免直接高温导致剧烈炭化,炭化会使测定结果偏低,并可能堵塞排废管路。

📊 抽检实况

基于全国食品安全监督抽检数据(2023-05-12 至 2026-06-05),共检出 41 条不合格通报。

不合格检测项 TOP 5
蛋白质 ×41
典型案例
雪融丹心(山楂) — 蛋白质:5.08g/100g(标准 ≧6.5g/100g,,不合格)(内蒙古自治区) 2026-06-05
牧场羊奶酪(含乳固态成型制品) — 蛋白质:5.22g/100g(标准 ≧6.5g/100g,,不合格)(内蒙古自治区) 2026-06-05
多种维生素B族 — 蛋白质:0.23g/100g(标准 ≥0.48g/100g,不合格)(安徽省) 2026-05-29
省份分布:内蒙古自治区(19条)、全国(6条)、福建省(3条)、甘肃省(3条)、江苏省(2条)
📊 查看完整抽检数据分析 →
数据来源:全国食品安全监督抽检公告 · 自动关联

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