氯霉素是一种禁用兽药，具有严重的再生障碍性贫血风险，不得在蜜蜂养殖中使用。然而，部分蜂农为防治蜂病违规使用氯霉素，导致其残留于蜂蜜中。作为食品检验员，必须严格监控其含量。依据《GB/T 18932.19-2003》，推荐使用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）进行确证检测。
称取10 g蜂蜜，加乙酸乙酯溶解，超声提取。
加入正己烷去脂，离心取下层。
采用固相萃取柱（如Oasis HLB）净化，甲醇洗脱。
浓缩定容：氮吹浓缩，甲醇:水（1:1）复溶。
LC-MS/MS分析：
流动相：甲醇-水（含0.1%甲酸）
质谱：ESI负离子模式，多反应监测（MRM）
定性依据：保留时间 + 2个子离子（m/z 321→152, 321→194）
定量：内标法（¹³C-氯霉素）
限量标准（农业农村部公告 第235号）：
蜂蜜中氯霉素：不得检出（检测限 ≤ 0.1 μg/kg）
提取效率需验证，回收率应在80%～110%。
LC-MS/MS需定期调谐，确保灵敏度。
若检出阳性，应立即封存样品，启动复测与溯源程序。
注意区分天然抗菌成分（如葡萄糖氧化酶）与化学残留。
氯霉素无安全阈值，极微量也可能引发健康风险。食品检验员通过高灵敏检测，震慑违规用药行为，推动蜂业绿色养殖转型。