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涂抹、落菌、水质微生物取样检测检验规范

微生物检验 菌落总数/大肠菌群 涂抹检测落菌检测水质检测微生物取样菌落总数大肠菌群
本文详细规定了涂抹、落菌、水质微生物取样的检测规范,包括表面、手部、空气和水样的采样方法、培养条件、计数标准及判定规则,适用于食品生产环境微生物监控。

📋 核心要点

📖 详细内容

≤5000个/25cm2

≤2500个/25cm2(熟)

梯度稀释,倾注接种营养琼脂培养基,36±1℃,48h后计数,报告

用浸有灭菌生理盐水的棉签在被检物体表面,取25cm2的面积,在其内涂抹10次,然后剪去手接触部分棉棒,将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检

一项不合格判为不合格品。不合格品按《不合格品控制程序》执行

≤30MPN/25cm2(生)

试管法:梯度稀释,三个稀释度接种LST肉汤培养基各三管,36±1℃,48h后记录产气管数,然后复发酵,记录产气管数,查MPN表报告

≤5000个/手(生)

≤2500个/手(熟)

梯度稀释,倾注接种营养琼脂培养基,36±1℃,48h后计数,报告

被检人五指并拢,用浸湿生理盐水的棉签在右手指曲面,从指尖到指端来回涂擦10次,然后剪去手接触部分棉棒,将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检

≤90MPN/手(生)

试管法:梯度稀释,三个稀释度接种LST肉汤培养基各三管,36±1℃,48h后记录产气管数,然后复发酵,记录产气管数,查MPN表报告

平板暴露法:车间在30m2以上者,于东、西、南、北(距墙1m处)、中五点;小于30m2者,于一条对角线里、中、外三点,高度均在1.5m处采样,打开平皿盖,使平板在空气中暴露30 min

取样后的琼脂培养基于37℃温箱培养48h后观察结果,求出5个或3个采样点的平均菌数

梯度稀释,倾注接种营养琼脂培养基,36±1℃,48h后计数,报告

对待取样的水龙头进行消毒,并打开水龙头数分钟,用经过灭菌的玻璃采样瓶去水样0.5L后及时送检,采样后按照每125ml水样加入0.1mg硫代硫酸钠除去残留余氯。

1次/月,全年检测完所有水龙头

1、乳糖发酵试验:接种5份10 mL水样双料培养基,每份接种10ml水样,将接种管置36℃ 士l℃ 培养箱内,培养24h2h,如所有乳糖蛋白膝培养管都不产气产酸,则可报告为总大肠菌群阴性,如有产酸产气者,则按下列步骤进行。

2、分离培养:将产酸产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上,于36℃ 土1℃ 培养箱内培养18h24h,观察菌落形态,挑取符合下列特征的菌落作革兰氏染色、镜检和证实试验。

3、证实试验:经上述染色镜检为革兰氏阴性无芽抱杆菌,同时接种乳糖蛋白胨培养液,置36℃ 士1℃培养箱中培养24h2h,有产酸产气者,即证实有总大肠菌群存在。

4、结果报告:查MPN ( most Probable number,最可能数)检索表,报告每l00ml水样中的总大肠菌群最可能数(MPN)值。稀释样品查表后所得结果应乘稀释倍数。如所有乳糖发酵管均阴性时,可报告总大肠菌群未检出

❓ 常见问题

Q: 表面涂抹采样如何操作?
A: 用浸有灭菌生理盐水的棉签在被检物体表面取25cm²面积,在其内涂抹10次,然后剪去手接触部分棉棒,将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检。
Q: 空气落菌检测的采样点如何设置?
A: 车间在30m²以上者,于东、西、南、北(距墙1m处)、中五点;小于30m²者,于一条对角线里、中、外三点,高度均在1.5m处采样,打开平皿盖暴露30分钟。
Q: 水质总大肠菌群检测的步骤是什么?
A: 1. 乳糖发酵试验:接种5份10mL水样双料培养基,36±1℃培养24±2小时,产酸产气者继续;2. 分离培养:转种伊红美蓝琼脂平板,36±1℃培养18-24小时;3. 证实试验:革兰氏阴性无芽孢杆菌接种乳糖蛋白胨培养液,产酸产气即证实;4. 结果报告:查MPN表,报告每100mL水样MPN值。

📊 抽检实况

基于全国食品安全监督抽检数据(2023-01-03 至 2026-07-04),共检出 1656 条不合格通报。

不合格检测项 TOP 5
大肠菌群 ×984菌落总数 ×672
典型案例
兰州牛肉面 — 菌落总数:(标准 n=5,c=2,m=104CFU/g,M=105CFU/g,不合格) 2026-07-04
道地肠(原味) — 菌落总数:(标准 n=5,c=2,m=104CFU/g,M=105CFU/g,不合格) 2026-07-04
幺贵麻辣脆(鲜切马铃薯片) — 大肠菌群:420CFU/g; <10CFU/g; <10CFU/g; 500CFU/g; <10CFU/g(标准 n=5,c=2,m=10CFU/g, M=102CFU/g; 菌落总数,严重超标)(未知) 2026-07-03
省份分布:重庆市(320条)、福建省(226条)、珠海市(202条)、河南省(149条)、黑龙江省(101条)
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数据来源:全国食品安全监督抽检公告 · 自动关联

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