在全民关注食品安全的当下，食品微生物检测作为食品安全检测不可或缺的一环，也成为食品安全检测的重中之重。通过食品微生物检验，可以判断食品加工环境及食品卫生情况，能够对食品被细菌污染的程度作出正确的评价，那么在食品微生物检测中，大家经常会遇到哪些问题？又该如何解决？
| 01.菌落总数的测定，只做一个稀释度行吗？
| 02.同一个稀释度，菌落总数一个在计数范围，一个不在计数范围，怎么计？
| 03.涂抹样品的检测，应当怎样计数和报告？
| 04.培养基配置有哪些注意事项？
| 05.剩余的培养基再次使用是否重新灭菌？
| 06.霉菌计数如何保证结果准确？
| 07.无菌水、生理盐水、磷酸盐缓冲液三者有什么区别？
| 08.培养皿接种后为什么要倒置？
菌落总数的测定,只做一个稀释度行吗？
不可行。在GB 4789.2中要求每个样品选择2-3个适宜的稀释度进行检测。即使一个样品已经基本可以确定了菌落数了，也建议多检测一个稀释度，多一个稀释度也会对检测结果进行验证，只测一个稀释度会存在风险。
另外如果严格按照国标要求，这样的检测也是不符合要求的，某些要求严格的外审部门可能会对此开具不符合项。因此在检测中还是应该严格按照国家标准执行。
同一个稀释度，菌落总数一个在计数范围，一个不在计数范围，怎么计？
同一稀释度的两个平板，一个在计数范围内，一个不在计数范围内，则以在计数范围内的平板的菌落数乘以稀释倍数作为报告结果。
举例来说明，某样品检测结果：10-1两平板菌落数分别为320、288，10-2稀释度两平板菌落数为27、23，则样品的检测结果应选取288进行报告，报告结果为2.9*103CFU/g。
涂抹样品的检测，应当怎样计数和报告？
涂抹样品检测的计数是比较复杂的，给大家举例子来说明！
假如你涂抹的样品面积是25cm²，采样的涂抹液是10mL，而检测只吸取1mL样液，即检测的是原样品的10-1的稀释度，即平板计数菌落*10为样品中的菌落数。结果报告就是菌落数/取样面积。例如，取样面积是25cm²，检测平皿上计数为13，则结果报告应该为13*10CFU/25cm²。
培养基配置有哪些注意事项？
(1) 灭菌温度要严格控制，按照要求灭菌，尤其含糖量较高的培养基温度不应太高，过高会导致糖分焦化，影响质量；
(2) 琼脂培养基不能反复溶化。反复溶化会破坏培养基中的营养成分；
(3) 培养基不能反复灭菌，反复灭菌也会导致营养成分的破坏；
(4) 含琼脂的培养基灭菌后，要摇匀。
剩余的培养基再次使用是否重新灭菌？
这分为两种情况。第一种情况，已经凝固后重新融化后使用的，根据GB 4789.28-2013中明确规定，未用完的培养基不可重新凝固留待下次使用。遇到这种情况，培养基只能弃置，并且国标要求，弃置也需要符合相关法律法规的规定。
第二种情况，首次灭菌后未用完的培养基，可待培养基凝固后再进行保存。但保存条件需避光干燥，保证其成分不会发生改变。再次使用时按照要求进行融化即可，不可二次灭菌。首次灭菌已开封但未使用完的培养基，不建议再次使用，毕竟存在风险。但若是液体培养基，就不存在融化的过程，首次灭菌后未使用完毕可按照国标要求保存，使用时需要保证培养基成分不发生改变，不可进行二次灭菌。若无法保证培养基是否符合要求，应当弃置。
霉菌计数如何保证结果准确？
霉菌菌落由孢子和菌丝组成，相当扩散，在直径9cm的平皿里，菌落数稍多就相互交叉重叠，影响计数，但数量太少又会产生较大的误差，因此选择适当的稀释度计数是保证结果准确的关键环节之一。
我们对这方面作了一些观察研究，首先是将实验菌株的斜面培养物制成含有约106个/ml的孢子悬液，并用血球计数器在显微镜下准确计数，然后将孢子悬液作10-1~10-6倍稀释，吸取不同稀释度的稀释液接种于PDA，25℃培养5天后计数。30种常见霉菌的两种不同计数方法所得结果比较显示，大部分菌株每平板含有10~50个菌落的稀释度时的计数与显微镜计数结果最接近；有近一半的菌株，每个平板含50~100个菌落已较难计数，而大部分菌株，超过100个/平皿或小于10个/平皿的计数结果就与显微计数结果存在较大差别，因此，应尽量选择10~50个/平皿的稀释度进行霉菌计数。
而对上述提及的菌丝很丰富、菌落特别扩散的毛霉、根霉、犁头霉等菌株，则应在更少的范围内计数(30个/平皿以内)。为控制霉菌的生长速度和菌落的生长范围，可在培养基中添加少量抗生素，如氯霉素(50~100mg/L)，金霉素(20~100mg/L)，庆大霉(50mg/L)，土霉素(100mg/L)等。
无菌水、生理盐水、磷酸盐缓冲液三者有什么区别？
无菌水就是简单的检测水进行灭菌；生理盐水是0.85%的NaCl水溶液；