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检出限/测定范围全解析

理化检验 检测方法基础 检出限测定限校准曲线分析空白检测方法灵敏度
本文系统解析了检验检测中检出限、测定限、最佳测定范围、校准曲线及分析空白等核心概念,包括定义、计算方法、影响因素及实际应用,为理解分析方法性能指标提供参考。

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在检验检测领域,检出限、测定限、最佳测定范围等概念是评估分析方法性能的核心指标,直接影响检测结果的可靠性与准确性。本文将系统梳理这些关键概念、计算方法及相关的校准曲线、分析空白等内容,为理解检验检测中的基础计量参数提供参考。

1.检出限指某特定分析方法在给定的置信度内可从样品中检出待测物质的最小浓度或最小量。所谓“检出”是指定性检出,即判定样品中存有浓度高于空白的待测物质。

检出限除了与分析中所用试剂和水的空白有关外,还与仪器的稳定性及噪声水平有关。在灵敏度计算中没有明确噪声的大小,因而操作者可以将检测器的输出信号通过放大器放到足够大,从而使灵敏度相当高。显然这是不妥的,必须考虑噪声这一参数:将产生两倍噪声信号时,单位体积载气或单位时间内进入检测器的组分量称为检出限。

N——噪声(mV或A);

D——检出限,其单位随S不同有三种:

Dg=3N/Sg,单位为mg/ml;

Dv=3N/Sv,单位为ml/ml;

Dt=3N/St,单位为g/s。

有时也用最小检测量(MDA)或最小检测浓度(MDC)作为检测限。它们分别是产生两倍噪声信号时,进入检测器的物质量(g)或浓度(mg/ml)。

不少高灵敏度检测器,如FID、NPD、ECD等往往用检出限表示检测器的性能。

灵敏度和检出限是两个从不同角度表示检测器对测定物质敏感程度的指标:前者越高、后者越低,说明检测器性能越好。

可见,测量方法的检出限与分析空白值、精密度、灵敏度密切相关,它是分析方法的一个综合性的重要计量参数。

1)在《全球环境监测系统水监测操作指南》中规定:给定置信水平为95%时,样品测定值与零浓度样品的测定值有显著性差异即为检出限(D.L)。这里的零浓度样品是不含待测物质的样品。

式中:σ—空白平行测定(批内)标准偏差(重复测定20次以上)。

国际纯粹和应用化学联合会(IUPAC)对分析方法的检出限D.L作如下规定:

在与分析实际样品完全相同的条件下,做不加入被测组分的重复测定(即空白试验),测定次数尽可能多(试验次数至少为20次)。

算出空白观测值的平均值Xb和标准偏差Sb。在一定置信概率下,被检出的最小测量值XL以下式确定:

Xb——空白多次测得信号的平均值;

Sb——空白多次测得信号的标准偏差;

K’——根据一定置信水平确定的系数。

与XL-Xb(即K’Sb)相应的浓度或量即为检出限:

D.L=(Xᴸ-Xb)/K=K’Sb/K

式中:k——方法的灵敏度(即校准曲线的斜率)。为了评估Xb和Sb,实验次数必须至少20次。

1975年,IUPAC建议对光谱化学分析法取k’=3。由于低浓度水平的测量误差可能不遵从正态分布,且空白的测定次数有限,因而与k’=3相应的置信水平大约为90%。此外,尚有将K’取为4、4.6、5及6的建议。

3)美国EPASW-846中规定方法检出限:MDL=3.143δ(δ为重复测定7次的标准偏差)。

4)在某些分光光度法中,以扣除空白值后的与0.01吸光度相对应的浓度值为检出限。

5)气相色谱分析的最小检测量系指检测器恰能产生与噪声相区别的响应信号时所需进入色谱柱的物质的最小量,一般认为恰能辨别的响应信号最小应为噪声的两倍。最小检测浓度系指最小检测量与进样量(体积)之比。

6)某些离子选择电极法规定:当校准曲线的直线部分外延的延长线与通过空白电位且平行于浓度轴的直线相交时,其交点所对应的浓度值即为该离子选择电极法的检出限。

光度分析中,虽然吸光度最小测读值为0.001,灵敏度也以A=0.001所相应的被测物浓度表示,但实际上惯常以A=0.05相应的被测物浓度作为有充分置信度的测定限,即最小能够可靠测定的浓度。这是因为,在吸光度A接近零的情况下,测定值与真实值之比即相对误差趋向无限大。

其次,由于比色皿的成对性不易做到完全匹配,尤其是使用已久的比色皿的成对性不易保证,因此吸光度很小的测量值在不同操作者、不同试验室之间常会不一致,除非操作者很有经验,十分注意比色皿成对性对测量的影响,并在每次测量时予以试验校正。

测定限为定量范围的两端,分为测定上限与测定下限。

在测定误差能满足预定要求的前提下,用特定方法能准确地定量测定待测物质的最小浓度或量,称为该方法的测定下限。

测定下限反映出分析方法能准确地定量测定低浓度水平待测物质的极限可能性。在没有(或消除了)系统误差的前提下,它受精密度要求的限制(精密度通常以相对标准偏差表示)。分析方法的精密度要求越高,测定下限高于检出限越多。

美国EPASW-846中规定4MDL为定量下限(RQL),即4倍检出限浓度作为测定下限,其测定值的相对标准偏差约为10%。日本JIS规定定量下限为10倍的MDL。

在限定误差能满足预定要求的前提下,用特定方法能够准

❓ 常见问题

Q: 检出限和测定下限有什么区别?
A: 检出限是定性检出待测物质的最小浓度或量,而测定下限是定量分析中能准确测定的最小浓度。测定下限通常高于检出限,例如美国EPA规定4倍检出限为定量下限,日本JIS规定10倍检出限。
Q: 如何绘制和使用校准曲线?
A: 校准曲线通过测定一系列标准溶液的信号值绘制,需进行空白校正。使用前应进行线性检验(相关系数|r|≥0.9990)、截距检验(与0无显著差异)和斜率检验(灵敏度变化在允许范围内)。样品测定时,将信号值经空白校正后从曲线查得浓度。

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