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酵母和霉菌的速测技术

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本文介绍了食品检验员进行酵母和霉菌快速检测的实用技术,包括微生物测试片法、显色培养基法、快速比色/荧光法及简易现场判断方法,重点推荐测试片法作为首选技术,并强调了操作要点、结果判读和注意事项。

📋 核心要点

📖 详细内容

食品检验员在进行食品微生物安全监控时,酵母菌和霉菌是重要的检测指标,尤其在糕点、面包、果酱、蜂蜜、乳制品、干果、调味品及冷藏食品中容易滋生。过量的酵母和霉菌不仅影响食品感官品质,还可能产生毒素(如霉菌产毒),危害人体健康。

虽然标准检测方法(如GB 4789.15)需培养5–7天,但通过快速检测技术,可在较短时间内完成初步筛查,适用于生产过程监控、市场抽检、仓储检查等时效性要求较高的场景。

以下是实用、可操作性强的酵母和霉菌速测技术,适合基层检验员使用。

一、微生物测试片法(纸片法)——最常用、最便捷

这是目前应用最广泛的酵母和霉菌快速检测方法,操作简单、结果清晰,无需倒平板。

3M™ Petrifilm™ 酵母和霉菌测试片

HACH、科桥、环凯等国产测试片

测试片上预置了适合酵母和霉菌生长的营养凝胶及特异性显色剂。样品中的酵母和霉菌在培养后形成可见菌落,通常为粉红色、红色或紫色(不同品牌颜色略有差异),霉菌菌落呈毛絮状或放射状。

取25g样品加入225mL无菌生理盐水或缓冲液,均质成1:10稀释液。

根据预期污染程度进行梯度稀释。

吸取1mL稀释液,滴加到测试片中央。

轻轻放下覆盖膜,用手指或压板从中心向外推平,避免气泡。

将测试片正置于恒温培养箱中,25–28℃ 培养 3–5天。

(部分快速型测试片可在48–72小时内初判)

酵母菌:圆形、光滑、粉红或紫色小菌落。

霉菌:毛状、絮状、蜘蛛网样扩散菌落,颜色多样(白、灰、绿、黑等)。

记录菌落数,乘以稀释倍数,得出每克(或毫升)样品中的酵母和霉菌总数(CFU/g或CFU/mL)。

无需倒平板,操作安全,防止气溶胶污染。

自带密封,可叠放培养,节省空间。

结果清晰,易于判读,适合非专业人员使用。

可用于固体、半固体、液体食品。

二、显色培养基法(快速鉴别)

使用含有特异性显色剂的培养基,可加速霉菌和酵母的识别。

DRBC(孟加拉红氯霉素琼脂)——抑制细菌,促进霉菌生长

YM琼脂、PDA马铃薯葡萄糖琼脂——通用培养基

显色型酵母/霉菌培养基(如CHROMagar™ Candida)——不同酵母呈不同颜色

样品稀释后涂布或倾注平板。

25–28℃培养3–5天。

观察菌落形态和颜色进行判读。

特异性较强,部分可区分不同霉菌或酵母种类。

成本较低,适合实验室使用。

三、快速比色/荧光法(高端设备辅助)

1. 阻抗法微生物快速检测系统

原理:检测微生物生长过程中电解质变化引起的阻抗变化。

特点:可在24–48小时内提示是否超标,适合液态食品(如果汁、饮料)。

2. ATP生物荧光法(间接评估)

虽不能区分酵母和霉菌,但可用于环境表面的卫生监控。

如发现操作台、包装材料、仓储货架RLU值异常升高,提示可能存在微生物污染风险,需进一步采样检测。

四、简易现场判断方法(辅助手段)

⚠️ 注意:感官判断仅作预警,不能替代定量检测。

六、常见问题与注意事项

酵母和霉菌培养基中通常添加氯霉素或抗生素抑制细菌生长。

若样品细菌含量极高,仍可能干扰,建议做适当稀释。

某些霉菌(如毛霉、根霉)生长迅速,可能覆盖邻近菌落。

建议选择合适稀释度,避免菌落过密。

霉菌菌落通常较大、蓬松,边缘不规则。

酵母菌落较小、光滑、湿润,类似细菌但生长慢。

不同食品类别限量不同,参考《GB 4789.15 食品微生物学检验 霉菌和酵母计数》及相关产品标准。

例如:糕点中霉菌/酵母 ≤ 100 CFU/g(部分即食食品要求更严)。

测试片应冷藏(2–8℃)保存,避免受潮。

使用前平衡至室温,防止冷凝水影响。

对于食品检验员而言,微生物测试片法是开展酵母和霉菌速测的首选技术,具备操作简便、结果可靠、安全性高的优点,非常适合现场和基层实验室使用。结合显色培养基和感官检查,可进一步提升检测效率。

虽然培养时间仍需3–5天,但相比传统方法更规范、更易操作,能有效监控食品在生产、储存、销售环节的真菌污染风险。发现超标样品应及时溯源,排查原料、环境、包装或储存条件问题,防止问题食品流入市场,保障消费者健康。

❓ 常见问题

Q: 食品中酵母和霉菌快速检测最常用的方法是什么?
A: 微生物测试片法(如3M Petrifilm酵母和霉菌测试片)是最常用、最便捷的速测方法。操作简单:取1mL样品稀释液滴加到测试片中央,推平后于25-28℃培养3-5天,酵母菌呈粉红或紫色圆形菌落,霉菌呈毛絮状菌落,计数后乘以稀释倍数即可得出结果。
Q: 酵母和霉菌速测中,培养温度和培养时间是多少?
A: 培养温度为25-28℃,培养时间通常为3-5天。部分快速型测试片可在48-72小时内进行初步判读。
Q: 使用微生物测试片法检测酵母和霉菌时,如何判读菌落?
A: 酵母菌落通常为圆形、光滑、粉红或紫色小菌落;霉菌菌落呈毛状、絮状、蜘蛛网样扩散,颜色多样(白、灰、绿、黑等)。记录菌落数后乘以稀释倍数,得出每克或每毫升样品中的酵母和霉菌总数(CFU/g或CFU/mL)。

📊 抽检实况

基于全国食品安全监督抽检数据(2023-01-13 至 2026-07-04),共检出 909 条不合格通报。

不合格检测项 TOP 5
菌落总数 ×672霉菌 ×237
典型案例
能量型维生素饮品 — 霉菌:(标准 ≤20CFU/mL,不合格) 2026-07-04
兰州牛肉面 — 菌落总数:(标准 n=5,c=2,m=104CFU/g,M=105CFU/g,不合格) 2026-07-04
道地肠(原味) — 菌落总数:(标准 n=5,c=2,m=104CFU/g,M=105CFU/g,不合格) 2026-07-04
省份分布:珠海市(173条)、重庆市(148条)、福建省(92条)、甘肃省(77条)、河南省(64条)
📊 查看完整抽检数据分析 →
数据来源:全国食品安全监督抽检公告 · 自动关联

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