食安寻FoodSeek

常见致病菌的速测技术

快检技术 致病菌检测 致病菌速测免疫层析法显色培养基LAMP恒温扩增沙门氏菌金黄色葡萄球菌
本文介绍了食品检验员对常见致病菌(沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌、副溶血性弧菌、大肠杆菌O157:H7、蜡样芽孢杆菌)的速测技术,包括免疫层析法、显色培养基测试片、恒温扩增(LAMP)等,强调增菌前处理、无菌操作和阳性确证的重要性,适用于基层监管和应急处置。

📋 核心要点

📖 详细内容

食品检验员在食品安全监管中,对常见致病菌的快速检测至关重要。这些致病菌是引发食源性疾病的主要原因,能在短时间内造成群体性健康风险。因此,掌握快速、灵敏、操作简便的速测技术,是及时发现隐患、阻断传播链的关键。

以下是针对食品中常见致病菌的实用速测技术,避免复杂公式和表格,突出现场可操作性,适合基层监管、餐饮单位、生产企业和应急处置场景。

一、沙门氏菌(Salmonella)

沙门氏菌是引起食物中毒最常见的致病菌之一,常见于禽肉、蛋类、奶制品、即食食品等。

免疫层析法(胶体金试纸条):样品经增菌(通常需6–8小时)后,取增菌液滴加到试纸条上,10–15分钟内判读。出现两条线为阴性,仅控制线显色为阳性。操作简单,适合现场初筛。

荧光定量免疫分析:配合便携式读数仪使用,可在增菌后定量检测,结果更准确,数据可追溯,适用于执法检查。

快速PCR检测盒:采用恒温扩增技术(如LAMP),无需复杂仪器,通过颜色变化或荧光信号判断是否含有沙门氏菌。整个过程可在2–3小时内完成,灵敏度高。

注意:所有速测方法均需前增菌和选择性增菌处理,不能直接检测原始样品。

二、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)

该菌广泛存在于人体和环境中,可通过带菌者污染食品,在适宜条件下产生肠毒素,导致呕吐型食物中毒,常见于乳制品、糕点、熟肉制品。

测试片法(如显色培养基测试片):使用含显色剂的选择性培养基,金黄色葡萄球菌形成特定颜色菌落(如紫色或金属光泽),24–48小时可判读。操作简便,适合现场实验室。

肠毒素快速检测试纸条:针对金黄色葡萄球菌产生的肠毒素(如SEA、SEB),采用免疫层析法直接检测毒素。样品处理后滴加,10分钟出结果。特别适用于已污染但细菌死亡的食品(毒素仍存在)。

ATP + 显色法组合:部分快速试剂通过检测菌体代谢活性或特异性酶反应进行初筛。

三、单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)

该菌耐低温,能在冰箱中生长,被称为“冰箱杀手”,常见于即食食品、冷鲜肉、乳制品、冰淇淋等。

免疫捕获法 + 快速培养:样品增菌后,用特异性抗体磁珠富集目标菌,再转入快速显色培养基,24–48小时观察结果。可提高检测灵敏度。

LAMP恒温扩增检测:无需PCR仪,恒温水浴即可完成扩增,通过颜色变化(如蓝绿色)判断阳性。整个流程约3小时,适合应急检测。

荧光免疫试纸条:增菌后取液检测,配合读数仪实现半定量,结果稳定可靠。

特别提醒:该菌在冷藏食品中风险高,应加强即食类食品的抽检。

四、副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)

主要存在于海水和海产品中,是夏季海鲜类食物中毒的主要元凶。

特异性增菌 + 显色培养基:使用含盐的选择性增菌液(如碱性蛋白胨水)培养6–8小时,转种至显色平板或测试片,典型菌落呈蓝绿色或紫色,24小时可判读。

PCR快速检测盒:针对tdh、trh毒力基因进行扩增,判断是否为致病型副溶血性弧菌。恒温扩增设备便携,适合沿海地区现场使用。

胶体金试纸条:增菌后检测菌体抗原,10–15分钟出结果,操作简便。

五、大肠杆菌O157:H7(致病性大肠杆菌代表)

该菌毒力强,少量即可致病,常见于未煮熟的牛肉、生鲜蔬菜、果汁等。

免疫层析试纸条:样品增菌后,检测O157菌体抗原或H7鞭毛抗原,10分钟内出结果。操作简单,适合屠宰场、农贸市场快筛。

显色培养基法:使用CT-SMAC或CHROMagar™ O157,致病菌形成典型菌落(如无色或紫色中心),24小时可识别。

多重PCR检测:可同时检测O157、H7及毒力基因(如stx1、stx2),提高准确性,适用于疑似中毒事件应急响应。

六、蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)

常见于米饭、面食等淀粉类食品,易在室温下长时间存放时繁殖并产毒,引发呕吐或腹泻型中毒。

选择性培养基 + 显色法:使用MYP(甘露醇卵黄多粘菌素)琼脂,典型菌落呈粉红色、周围有沉淀环。结合菌落形态和溶血特征初步判断。

快速测试片:商品化测试片可在24–48小时内完成计数和初步鉴定。

毒素检测试纸条:针对其产生的肠毒素,进行免疫学检测,判断致病风险。

ATP生物荧光法:虽不能识别具体致病菌,但可用于食品接触面、工器具、操作台的卫生状况评估。RLU值过高提示清洁不彻底,存在致病菌污染风险。

恒温扩增设备(LAMP、RPA):不依赖复杂PCR仪,可在现场完成核酸扩增,配合试纸条或荧光仪判读,适合突发公共卫生事件。

便携式微生物快速检测仪:集成增菌、检测、分析功能,部分型号可实现多种致病菌联检。

前处理是关键:所有致病菌速测均需经过增菌培养(6–24小时),不能直接检测原始食品,否则灵敏度极低。

❓ 常见问题

Q: 食品中沙门氏菌的快速检测方法有哪些?
A: 沙门氏菌速测常用免疫层析法(胶体金试纸条)、荧光定量免疫分析和LAMP恒温扩增技术。所有方法均需前增菌6-8小时,试纸条10-15分钟出结果,LAMP约2-3小时完成,灵敏度高,适合现场初筛。
Q: 单核细胞增生李斯特菌为什么被称为“冰箱杀手”?如何快速检测?
A: 该菌耐低温,能在冰箱冷藏温度下生长,污染即食食品、冷鲜肉等。快速检测可用免疫捕获法结合快速培养(24-48小时)或LAMP恒温扩增(约3小时),后者通过颜色变化判断阳性,适合应急检测。
Q: 速测技术检测致病菌时需要注意哪些关键点?
A: 关键点包括:所有速测方法需经过增菌培养(6-24小时),不能直接检测原始样品;操作必须严格无菌;阳性结果需送实验室用PCR、质谱或血清学方法确证,不能仅凭速测结果进行行政处罚;样品应冷藏运输,尽快检测。

📊 抽检实况

基于全国食品安全监督抽检数据(2023-01-30 至 2026-07-01),共检出 177 条不合格通报。

不合格检测项 TOP 5
沙门氏菌 ×90金黄色葡萄球菌 ×87
典型案例
风干鸡胸肉(五香味) — 沙门氏菌:检出,未检出,未检出,检出,检出(标准 n=5,c=0,m=0,不合格)(陕西省) 2026-07-01
五香粉 — 沙门氏菌:未检出;检出;未检出;未检出;未检出(标准 n=5,c=0,m=0,不合格)(陕西省) 2026-04-16
红牛维生素功能饮料 — 沙门氏菌:(标准 ,不合格)(重庆市) 2025-12-31
省份分布:珠海市(148条)、重庆市(27条)、陕西省(2条)
📊 查看完整抽检数据分析 →
数据来源:全国食品安全监督抽检公告 · 自动关联

📎 相关文章