沙门菌属体型大多为(0.7~1.5)μm×(2.0~5.0)μm,其无芽胞,是无荚膜的革兰阴性直杆菌,除鸡沙门菌外都有周身鞭毛,能运动,多数有菌毛。
营养要求不高,在普通琼脂培养上即能生长,在液体培养基中呈均匀混浊。在SS琼脂和麦康凯琼脂培养基上35℃~37℃ 24h可形成直径约2~4mm的透明或半透明菌落,对胆盐耐受。产H2S者在SS琼脂上形成黑色中心。
除亚利桑那菌沙门菌外均不能发酵乳糖,大多数IMViC试验为-+-+,KIA:K/A、产气+/-、H2S+/-,MIU:动力+、吲哚-、脲酶-。
主要由0抗原和H抗原组成,部分菌株有类似大肠杆菌K抗原的表面抗原,与细菌的毒力有关,故称Vi抗原。
1. 0抗原:即菌体抗原。沙门菌属的菌体抗原有58种,以阿拉伯数字依次标记:根据沙门菌有共同的O抗原这一特点,分类学者将有共同抗原的细菌归为一组,这就使沙门菌分成42个群(或组)。即A、B、C……Z和O16~O67群。每群都有群特异性抗原,如A群O2、B群04、D群O9等。
2. H抗原:即鞭毛抗原。H抗原是定型的依据。
沙门菌H抗原有两相,第一相为特异性抗原,用a、b、c……表示;第二相为共同抗原,用1、2、3……表示。
3. 表面抗原:已证实沙门菌属有Vi、M和5抗原三种。Vi抗原加热60℃30min或经石炭酸处理被破坏,其存在时可阻止0抗原与相应抗体发生凝集。
1. S-R变异,菌落光滑型经人工培养传代后逐渐变成粗糙型。此时菌体表面的特异多糖抗原丧失,在生理盐水中可出现自凝。
2. H-O变异,指有鞭毛的沙门菌失去鞭毛的变异。
3. 相位变异,具有双相H抗原(第I相为特异相,第Ⅱ相为非特异相)的沙门菌变成只有其中某一相H抗原的单相菌,称相位变异。
4. V-W变异,失去全部Vi抗原的变异。
致病因素有侵袭力、内毒素和肠毒素3种。临床上可引起胃肠炎、肠热症、菌血症或败血症等。其中肠热症属法定传染病。
1. 肠热症:即伤寒与副伤寒病。由伤寒与副伤寒沙门菌所引起的慢性发热症状。为法定传染病之一。
2. 食物中毒:引起食物中毒的沙门菌以鼠伤寒、肠炎、汤卜逊、猪霍乱、乙型及丙型副伤寒沙门菌为常见。
3. 慢性肠炎:沙门菌可引起老人和儿童的慢性肠炎。
4. 败血症:多由猪霍乱沙门菌引起。
5. 沙门菌的局部感染。如颈部、腰部等。
(1)不同标本的分离培养
①粪便:一般将粪便或肛拭直接接种于SS和麦康凯平板上,用两种培养基的目的是为提高标本的阳性检出率。
②血液和骨髓:抽取患者血液5mL或骨髓0.5mL,立即接种于含0.5%胆盐肉汤或葡萄糖肉汤5mL试管中进行增菌,48h将培养物移种到血平板和肠道鉴别培养基上,若有细菌生长取菌涂片革兰染色并报告结果。对增菌培养物连续培养7天,仍无细菌生长时,则报告阴性。
③尿液:取尿液2~3mL经硫磺酸盐肉汤增菌后,再接种于肠道菌选择培养基或血平板上进行分离培养,亦可将尿液离心沉淀物分离培养。
沙门菌属的鉴定与志贺菌属相同,须根据生化反应和血清学鉴定两方面进行。
①初步鉴定:如为革兰阴性杆菌时作氧化酶试验,阴性时,挑取可疑菌落分别移种于KIA和MIU上。并作生化反应。以沙门菌多价诊断血清作玻片凝集试验。凡符合KIA:K/A、产气+/-、H2S+/-、MIU:动力+、吲哚-、脲酶-,氧化酶-,触酶+,硝酸盐还原+,以沙门菌多价血清作玻片凝集试验阳性,鉴定为沙门菌属。
②最后鉴定:沙门菌血清学鉴定主要借助于沙门菌O抗原多价血清与O、H、Vi抗原的单价因子血清。甲型副伤寒沙门菌、鼠伤寒沙门菌和伤寒沙门菌分别属于A、B、D血清群。
2. 血清学诊断与分型
(1)肥达试验:肥达试验是一种试管凝集反应。用已知的伤寒杆菌O、H抗原和甲、乙型副伤寒杆菌H抗原,与待测血清作试管或微孔板凝集实验,以测定血清中有无相应抗体存在,作为伤寒、副伤寒诊断的参考。
由于沙门菌95%属于A-F群,所以先进行A-F多价O血清凝集,依据6个O因子血清分别定群,分为A群、B群、C1亚群、C2亚群、D群、E群、F群综合H因子血清第一、第二组。依据凝集结果决定所属血清型。
用生化反应鉴定为沙门菌后,需要进一步用分型血清进行分型。沙门菌的血清学分型在鉴定中有着关键的作用。分型应用成套的沙门菌因子血清做玻片凝集法,一般分三步进行:
①由于沙门菌95%属于A-F群,所以先进行A-F多价O血清凝集,依据6个O因子血清分别定群:O2凝集者为A群,O4为B群,O7为C1亚群,O8为C2亚群,O9为D群,O3,10为E群,O11为F群。
属于A-F各O群的常见菌型依次用下表所述H因子血清检查第一相和